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鼠耳组织疏螺旋体菌之分离培养与显微镜镜检

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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鼠耳组织疏螺旋体菌之分离培养与镜检
本研究将捕获鼠类之耳组织于携回实验室后,分批进行疏螺旋体
菌之分离培养处理,并必须于采获后 2 週内完成疏螺旋体菌分离培养
工作,以确保鼠耳组织内既有疏螺旋体菌之存活。鼠耳组织在进行分
离培养之前,首先将两翼之鼠耳组织于盛有 75% 乙醇溶液之小烧杯中
浸泡约一分钟,以便将鼠耳体表之多数嗜氧性杂菌去除。随后则以细
镊子将鼠耳置于无菌纱布中,以吸乾沾附在鼠耳体表之多馀酒精溶
液,并使用过火杀菌后之组织剪将鼠耳组织剪成小块多片之组织碎片
(大小约 3 mm × 3 mm),再将每一鼠耳翼组织碎片置入装有 2 ml 螺
旋体培养基(BSK-H medium, Sigma Co., U. S. A.)及 6 %无菌兔血
清(Rabbit serum)之无菌培养试管(Sarstedt, Germany)中(7,38),
并置于二氧化碳细胞培养箱(Nuaire, U. S. A.)内,在 35℃之培养
温度及 5%之二氧化碳浓度条件下进行鼠类鼠耳组织疏螺旋体菌之分
离培养试验。培养后每週抽取 10 μl 之螺旋体培养液,以高倍放大倍
率(400X)之暗视野显微镜进行镜检观察乙次,连续观察八至十週,
并记录疏螺旋体菌之阳性培养结果及培养所需天数,以做为研究螺旋
体菌分离培养之实验参考数据
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