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利用发光菌来探讨各种毒物对细菌的影响!光学显微镜百科

信息分类:生命科学小百科    作者:YIYI发布 

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研究动机
传统的水污染侦测方式都是利用物理及化学的方法,包括溶氧量、pH值、电导度、氧化还原电位、气液相色层分析系统……等,

这些方法具有极高的专一性和准确性,但是另一方面来说,却耗时而且又昂贵。水污染严重,且污染地区又多,以传统的侦测方法无法确实有效的控管水污染的情况。
因此研发「生物环境技术」是未来的一个新趋势。以生化指标的反应取代传统的外部环境因子检测指标,可以快速了解工厂废水特性的变化,并持续侦测废水中各类生物抑制性物质,达到控制工厂废水处理与排放情形,并维持系统稳定性的
目的。这个方法是一个省时又方便的法子。

但在运用此项技术之前,必须先对细菌受影响的机制进行研究及了解,才能知道什么样的菌可以被哪些物质影响,又可
以表现出哪些容易侦测到的行为。

 研究目的
这个实验的原理是利用细菌会感应环境物质而调控菌体本

身基因的表现,进而影响到酶的活性,使得冷光的亮度与水中毒性物质的浓度成一定比例。
所以我们利用发光菌来探讨各种毒物对细菌的影响,并设法改进此系统的敏感性,进而应用在实际废水侦测上。


研究过程或方法

(1) 养菌
1. 将生物感应器(biosensor)菌株(rssA/pfabG)养在MGM培养液中。

2. 置于30°C的震盪培养箱过夜。
3. 将过夜的菌液以1:100的比例添加到新鲜的MGM培养液

4. 置于30°C的震盪培养箱养约1至1.5小时。
(2) 测OD值
1. 取1ml的MGM加入A 比色管。
2. 另取1ml的菌液加入B 比色管。
3. 以A置入测光机归零。
4. 放入B测值。
(3) 序列稀释
1. 将待测的药物分别加蒸馏水稀释为由高至低的15个浓
度。
2. 取15个发光试管各加入1ml的菌液。
3. 每个浓度的药各取200μl加入试管中。
4. 溷合均匀后静置15分钟。
(4) 测光
1. 将试管排入机器中,每隔一个便放置一个空的试管。(以
免试管发出来的光互相干扰)
2. 打开程式,开始测光。
3. 将测出来的数据整理成表格。
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