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用高倍率的物镜聚焦在萤光样本上提高显微镜解析度

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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用高倍率的物镜聚焦在萤光样本上提高解析度

另一个将光学影像空间解析度向前迈进一大步的是由德国 Stefan Hell 教授所发展的远场光学奈米显微术。

这个技术是由扫瞄萤光显微术出发,也即将激光用高倍率的物镜聚焦在萤光样本上,
移动焦点在样本上扫瞄并不断收集每一点的萤光强度,累积起来即可组合成一张萤光影像。

重要的突破点在于想出要提高解析度,除了尽可能把聚焦光点弄小之外,能不能让发出萤光的范围缩小?

要知道,所谓绕射极限并没有限制我们观察距离很远的个别单分子萤光的能力,

但是当这些萤光分子间距离近到小于绕射极限时,我们就会无法分辨个别分子位置。

假设有两个同样的萤光分子 A 和 B 靠的非常近,正常的聚焦光点一定会同时激发这两个分子的萤光,
如果有某种办法在激发时强迫旁边的 B 不发光,只有 A 发光。接着再移动样本或光点使得 B 发光 A 不发光,
便有可能在空间上解析出 A 和 B 的影像来。因此,Hell 教授提出的概念基本上是想办法将焦点附近的萤光分子的发光能力暂时抑制掉,
他将之命名为 STED 
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