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问下倒置生物显微镜如何辨别坏死细胞呢?

信息分类:生命科学资讯    作者:yiyi发布 

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问下倒置生物显微镜如何辨别坏死细胞呢?

上海光学仪器厂回复:
细胞坏死与细胞凋亡:细胞死亡可分细胞坏死和细胞凋亡两种,其作用机制如下

〈1〉细胞凋亡〈apoptisis〉:多细胞生物再胚胎发展过程、免疫调节及维持体内环境恆定中,必须藉由引发自杀的

机制来移除多馀或功能不全的细胞。这种机制因为受到遗传基因的控制,故又称程式性死亡〈programmed cell

death〉。恶劣的环境如过冷或是过热、紫外线,缺氧或化学药物等都可能使细胞伤害,启动程式引发凋亡,可以

保护生物个体,避免细胞脱离控制,造成突长。细胞凋亡一旦发生,将会造成细胞核消失、DNA片段化、最后细

胞分解成许多具有完整细胞膜的凋亡小体〈cell bodies〉。由于细胞膜仍完整,因此其内所含有的细胞分解后有毒

物质并不会释放,因此可避免週遭组织的发炎和伤害。这些凋亡小体很快会被週遭的吞噬细胞〈phagocytes〉或其

他细胞吸收。

〈2〉细胞坏死〈necrosis〉:通常是较严重的物理化学伤害所造成,主要是细胞通透性发生改变而膨胀或破裂,并

造成溶体〈lysosome 〉释放出各种分解酵素和细胞激素〈cytokines〉等物质,而使週遭组织受伤引起发炎反应。

3. 水中污染物对人类细胞的影响:水中的污染物种类包含微生物,包括细菌、病毒、原生动物等;有机物,包

括各种挥发性有机物、合成有机物、消毒副产物、清洁剂、农药等;无机物,包括各种重金属、盐类、氯、溶解

性固体物等。这些污染物对于人体的影响甚钜,故藉由观察细胞经污水处理后的改变,则可了解这些污染物对于

人类细胞的影响。
三. 材料

1. 细胞株:人类子宫颈癌细胞〈HeLa cell〉

2. 试剂:锥蓝-用于染细胞

              Saponin-介面活性剂,可将细胞膜均匀打洞,使膜结构鬆散

              H2O2-可引起程式性死亡

             NaCl-配置生理食盐水,0.9% NaCl为人的等张溶液

3. 待测样本:外双溪溪水

4. 器材:载玻片、盖玻片、微量吸管、光学显微镜


1.细胞鲜活良好时:在倒置生物显微镜下,可以看到细胞透亮,呈自然伸展状态。状态不好时,细胞部分伸展,或飘浮,坏死的细胞有点发黑并飘浮。

2.悬浮细胞主要是根据细胞的透亮程度,状态良好时,细胞透亮,状态不好时,可见细胞有颗粒状,发黑。

3.取部分细胞用4%的台盼兰染色,活细胞不着色,死细胞着色 
 

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