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显微镜下观察Erwinia 软腐细菌具周生鞭毛!

信息分类:生命科学资讯    作者:本站小编yiyi发布 

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细菌性软腐病 Bacterial soft rot
由 Erwinia carotovora subsp. carotovora 或 Erwinia chrysanthemi 所引起,
可引起一般蔬菜、花卉、特用及粮食作物之软腐,显微镜下观察Erwinia 软腐细菌具周生鞭毛,
有游动性与趋化性,可逃离或避开不良环境,到达有利于存活或感染寄主组织之位置,并有助于其
对寄主组织之致腐能力;为兼性嫌氧菌,可在无氧环境下生长,因而增加其与其他微
生物在自然环境中竞争之能力;常由伤口侵入寄主之幼嫩组织或贮藏器官;可分泌大
量之果胶分解酵素将植物细胞壁和中胶层中之果胶物质分解,因而造成植物组织之软
腐。本病之病征最初会在被害部位出现变色水浸状斑点,迅速扩大腐烂软化成污泥状。
若在叶片,因空气乾燥,病斑失水乾燥而破裂,即停止发展。Erwinia 软腐细菌之侵入
方式以伤口为主,若叶表具有水膜可帮助软腐细菌之感染。本病菌可以低量残存于土
壤根圈中,若有植株残体或低温时,可延长其存活时间。本病害之诊断可藉由田间病
征进行初步之推测诊断,将罹病植株样本带回实验室后,经镜检确定为细菌性病害,
可先利用 NA 培养基进行分离纯化,在 30℃培养约 24 小时后,自其中挑取半透明、圆
形之菌落,进一步利用 CVP 培养基
(1 N NaOH, 4.5 ml; 10% CaCl2·2H2O, 3.0 ml; NaNO3,1.0 g; Agar, 1.5 g; Sodium polypectate, 10.0 g; 0.075% crystal violet, 1.0 ml; DW, 500 ml)
确认其是否具有果胶分解酵素,必要时可再进行相关之生理生化测试以进行确认诊
断。此外也可利用引子对
5A(5’-GCGGTTGTTCACCAGGTGTTTT-3’)、
5B(5’-ATGGCACGCTACCTGGAAGTAT-3’)、
Y1(5’-TTACCGGACGCCGAGCTGTGGCGT-3’)、
Y2(5’-CAGGAAGATGTCGTTATCGCGAGT-3’)
运用PCR 技术针对罹病组织进行侦测鉴定,其中引子对 5A/5B 可针对 E. chrysanthemi 增幅
出 500 bp 之 DNA 片段,引子对 Y1/Y2 可针对 E. carotovora subsp. carotovora 增幅出 434
bp 之 DNA 片段。其它鉴定方式如血清技术与 Biolog 快速鉴定系统等则皆可用來快速
鉴定 Erwinia 软腐细菌之用。
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