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怎样用电子显微镜观察三个单株抗体?

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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     病毒的致病原因和感染途径则是刻不容缓。第一个步骤便是将病毒附着于细胞上,使病毒与细胞上的接受子结合。病毒与细胞上的接受子具有专一性,也就是说,若某一病毒可感染某组织,则此组织必定有专一于此病毒的接受子。
     为了解病毒的致病原因,分析接受子的特性即为一个很重要的课题。本篇报告中研究出三个单株抗体(MAbs)M45、G35及Q3,因MAbs与虹鳟生殖细胞结合,所以可保护RTG-2不受VHSV的感染,但这种保护功能仅限作用于鲑形目所建立的细胞株,说明Mabs与细胞的结合具有种的专一性。令人意外的是,发现Mabs与RTG-2的receptor结合,除了可保护RTG-2不受VHSV的感染外,亦可保护RTG-2不受其他Rhabdoviridae的鱼类病毒感染。
     利用免疫萤光及免疫电子显微镜观察后,证实三个单株抗体M45、G35及Q3在细胞与病毒结合之前,皆先与细胞膜结合以达到保护细胞的作用,且经由免疫沉淀的实验发现receptor是由两个大小分别为200 kDa和44 kDa的蛋白质组成的複合物,此複合物经生化分析后得知其中一部份包含纤维黏蛋白质(fibronectin),且此部份是Rhabdoviridae病毒对细胞最主要的receptor。取200 kDa的蛋白质製作抗体,另外并以Escherichia coli表现虹鳟的纤维黏蛋白质,发现此抗体会与此表现蛋白结合。而纯化的虹鳟纤维黏蛋白质亦具有与VHSV结合的能力。 Rhabdoviridae此科病毒对低等嵴椎动物感染途径的研究上,是最先明确证实细胞膜成分是病毒感染细胞主要的receptor。
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