1)首先要知道自发荧光因为什么而来,是样品本身带来的,还是样品外部的东西造成的。
2)如果无法避免,那么找一个光谱仪器,读一边样品的光谱,看看激发光谱和发射光谱长什么样。
3)比如说有些fixation agent自发荧光比较强。如果是外部的东西造成的,尽量改protocol。
4)然后染色时尽量避免使用和自发荧光发射光谱重合的染料。比如说,如果发射光谱的高峰在520nm段,最好不要用GFP一类的dye。
5)如果实在避无可避,找一台可以做光谱扫描的显微镜,做 spectral unmixing。