星型胶质细胞原代培养具体步骤
1、消毒用酒精棉球擦就可以了,浸泡是不会减少污染几率的!而且浸泡会对脑组织有破坏。
2、剥脑膜在解剖显微镜下用解剖镊就可以了!
3、0.125% 胰蛋白酶,37℃震荡消化10min后,用含10% FBS 的DMEM培养液终止消化后轻轻吹打完过滤就行,将滤液1000r/min离心5min,弃上清.用含10% FBS 的DMEM培养液重悬沉淀,用吹打管仔细吹打成均匀的细胞悬液!接种就行!
4、差速黏附去除成纤维细胞时间我们的经验一般20分钟,时间太长胶质也贴壁了!你可以自己摸索调整!
双目体视显微镜
三目体视显微镜
长臂万向体视显微镜