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神经干细胞培养耗材和试剂及培养前的准备工作

神经干细胞培养耗材和试剂及培养前的准备工作
一、实验材料
实验动物:孕14-16天SD (Sprague-Dawley)大鼠。
二、手术器械:
显微手术剪、镊子、手术刀和解剖显微镜
三、细胞培养及分子生物学试剂:
DMEM/F12 、hEGF、 hbFGF、N2 supplement、B27 supplement 、PBS,胎牛血清,L-谷氨酰胺、多聚赖氨酸(Poly-L-lysine)。
四、神经干细胞培养液的配制:
DMEM/F12培养液97ml加入EGF、bFGF、N2 supplement 1ml和B27 supplement 2ml、L-谷氨酰胺0.4mmol,配成100ml神经干细胞培养液(其中含EGF 20ng/ml, bFGF 20ng/ml, N2 1%, B27 2%, Glutamine 4mmol/L)。
五、神经干细胞分化液的配制:
DMEM/F12培养液中加入20ml FBS,配成100ml神经干细胞分化液。