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荧光显微镜在同一试管内检测多种病毒的微阵列分析法

荧光显微镜在同一试管内检测多种病毒的微阵列分析法 
背景:
同时检测多种病毒的在疾病诊断和预防控制中具有十分重要的意义。微阵列分析是一种很好的能同时检测多种病毒的方法,但操作过程十分复杂。
方法:我们建立了一种新的PCR分析方法,即一个试管内的微阵列体系。该体系整合了检测多种病毒的PCR和DNA微阵列分析,设计一个能同时检测4种呼吸道病毒(SARS相关病毒、流感病毒A、B和肠道病毒),且具有内对照的5*5的寡核苷酸芯片,固定在具有一个透明小窗的特制的EP管盖内表面。
结果:我们应用该体系可以一次加入试剂后不用打开EP管盖进行4种病毒检测过程的所有步骤。4种病毒在EP管内经过一步法逆转录PCR扩增后将EP管颠倒,带有荧光标记的PCR产物和管盖上的DNA芯片进行杂交,用荧光显微镜即可检测杂交信号。该体系检测病毒的敏感度可达102copy/ul,并且具有内对照,可有效地减少假阳性和假阴性的发生,提高了特异性。
结论:一个试管内的微阵列体系是用于简单、快速地同时检测多种病毒的有效工具,具有方便、防止PCR产物的交叉污染的优点,并可应用于同时进行多基因的检测。

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