（激光）共聚焦显微镜和全内反射显微镜原理及应用的区别？

1）首先要知道自发荧光因为什么而来，是样品本身带来的，还是样品外部的东西造成的。

2)如果无法避免，那么找一个光谱仪器，读一边样品的光谱，看看激发光谱和发射光谱长什么样。

3）比如说有些fixation agent自发荧光比较强。如果是外部的东西造成的，尽量改protocol。

4)然后染色时尽量避免使用和自发荧光发射光谱重合的染料。比如说，如果发射光谱的高峰在520nm段，最好不要用GFP一类的dye。

5)如果实在避无可避，找一台可以做光谱扫描的显微镜，做 spectral unmixing。