显微镜下调整针的焦距-微小操作制程辅助仪器
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
显微注射
（一）准备显微注射用针
1.取一干净之大培养皿，在一侧铺一块封口膜（parafilm），将 parafilm
折叠成有厚度条状，并黏上双面胶，固定在另外一侧。
2.卫生纸浸水揉成团状，置培养皿两侧。
3. 在上面滴上要注射之 DNA，小心放上针，使针的尖端恰巧碰到 DNA
水珠，针的另一端固定在双面胶上垫高。如下页图四所示。放置一段
时间，利用虹吸作用可以将液体吸入针中4.将针固定在 needle holder 上，用粗调节轮将握针器末端的针移至中
央。
5.显微镜下调整针的焦距并将针头位置移到视野的正中央，接着将针轻
微地上移，使针的前端变得稍微模糊
制作显微注射用玻片（microinjection pad）及测试
1.配制 2﹪的 agarose。
2.取一玻片，在上面滴上一滴 agarose（约 25μl），在其未凝固之前盖
上另一玻片，使之呈扁平状，等到凝固后轻轻将上方玻片水平移开。
3.反覆 2.制作数个 microinjection pad。
4.放在室温下过夜或是放在 80°C 的 heater 上 1 小时，放在一旁备用。
5.取一完成的 microinjection pad，在上面呵气，纪录呵气时间。迅速滴
上一滴 Halocarbon oil 700。
6. 用挑虫用针将一只线虫挑起并轻放到 microinjection pad 上，用睫毛较
长的针轻压虫，使虫可以固定在 microinjection pad 上。
7. 约半小时后，在油滴中加入 PBS，观察线虫是否有离开
microinjection pad 并游动
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