蚜虫吸植物韧皮部汁液-昆虫观察显微镜
信息分类：生命科学资讯 作者:YIYI发布
蚜虫吸植物韧皮部汁液-昆虫观察显微镜
蚜虫是常见的农业害虫，以吸食植物韧皮部汁液维生，体内含有内共生菌Buchnera aphidicola，
两者为绝对的互利共生关系。Buchnera会提供宿主蚜虫色胺酸（tryptophan）和苯丙胺酸（phenylalanine）
两种芳香族胺基酸。3-deoxy-D-arabino- heptulosonate-7-phosphate synthase (DAHPS)
为芳香族胺基酸合成路径所需要的酵素，aroH 为Buchnera DAHPS 唯一的编码基因。Buchnera aroH
缺乏转录及转译层级的调控，
其异位调控推测区和其他细菌没有完全保守，且因为Buchnera基因的表现不需要随生长环境的变化而改变，
是故认为Buchnera DAHPS可能不受回馈调控。由于Buchnera 无法在蚜虫体外进行一般细菌培养实验，
研究的目的在于建立E. coli 表现系统，来研究Buchnera DAHPS 酵素功能及回馈调控。实验结果得知，
Buchnera DAHPS 可以补偿大肠杆菌芳香族胺基酸突变株的营养缺失，测得Buchnera DAHPS对受质PEP及E4P的Km分
别为176 μM及290 μM，会受到最终产物tryptophan与phenylalanine的部份抑制，I0.5分别为19.7 μM
与168.4 μM，最大抑制百分比为61.7％与72.1％。进一步利用overlap-extension PCR建立带有T7 promoter
的表现载体，转型到大肠杆菌BL21 (DE3) T7 系统，虽然可以大量表现Buchnera DAHPS，
但表现蛋白出现在不可溶的部份，尝试低温诱导、共同表现及重新折叠，
仍无法改善其错误折叠及稳定使其恢复活性
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