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生物显微石蜡切片样品制片的步骤和原理

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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生物显微石蜡切片样品制片的步骤和原理

    石蜡制片法(paraffin sectioning ),即用石蜡作为包埋剂,
将植物组织经固定、脱水、透明后包埋在石蜡中,然后用切片机切片,
所以称作石蜡切片法。

    石蜡制片有许多优点:①易操作。

    ②可以把材料切成均匀、极薄((1 一12μm )的切片。

    ③切下的单个

    蜡片可以连接形成蜡带,有利于作连续切片,这是其他制片法难
以达到的,除一些极小的材料因经不住石蜡切片法中所应用的各种试
剂处理,而不能用于石蜡切片外,一般的材料都可以用石蜡切片法制
片。④可永久保存。石蜡切片也有缺点:制片需要较长的时间,操作
过程较复杂;在脱水与浸蜡后,容易使组织收缩、变硬、变脆;坚硬、
易脆的材料不适宜用石蜡制片法。

    石蜡制片的应用:石蜡制片可用于:①研究植物的发育,如小麦
的小抱子发育、大饱子发育、双受精过程、胚的发育等②植物器官和
组织的结构,如根、茎、叶、子房和胚珠的结构

    ③组织化学④RNA 原位杂交。

    ⑤组织切片原位PCR.一般来说,用冰冻切片法制备的切片做原位
杂交,对所要检测的DNA 或RNA 的阳性检测率要高于石蜡切片。这是
因为冰冻切片避免了对组织细胞的核酸保存不利的处理,而石蜡切片
中对组织细胞处理往往会破坏核糖核酸。

    但是冰冻切片的组织细胞形态学特性的保存则大大逊色于石蜡切
片。因此在选择使用何种切片方法时要权衡考虑。可先试用石蜡切片,
如果待检测的靶核酸量少,石蜡切片染色弱,则应采用冰冻切片。

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