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教学用生物显微镜-怎样制样植物细胞载玻片

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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教学用生物显微镜-怎样制样植物细胞载玻片

醋酸洋红染色的方法

    1.取材一般在上午10时-11时,取生长茂盛,新鲜的根部或茎尖,
并切取1 厘米左右的根尖或茎尖。为了获得较多的分裂细胞,可将三
角瓶内小苗先置于10℃左右低温一昼夜,第二天取出放于常温下2-6
个小时,使细胞剧烈分裂,然后再行切取。

    2.前处理“将切下的根尖放入蒸馏水中,在0 ℃-3℃的条件下处
理12-24 小时。或用0.2%秋水仙碱、饱和对二氯化苯,0.3M的8-羟基
喹宁,任选其一处理2-5 小时也可。至于那一种能获得较好较多的分
裂相,达到染色体缩短和染色单体更加分散,而染色体轮廓得以清晰
的目的,需经多次实验,才能找到

    3.固定一般用冰醋酸1 份,无水乙醉3 份,混合后配成固体液,
固定材料2-24小时如果不能在短时间内观察,可将固定的材料用95%
酒精洗净其醋酸味,移入70% 酒精中,在阴凉处保存

    4.解离有2 种方法比较常用(1 )将材料放入盐酸酒精液(浓盐
酸1 份+95 % 酒精1 份)中,处理约2-5 分钟。时间过长材料不易染
色,时间过短细胞不易分散。然后流水冲洗。

    (2 )将固定后的材料,流水冲洗10分钟,放入iNHC1 中,于60
℃下水解5-15分钟。取出水洗。

    5.染色和压片

    将解离后的材料,置载玻片上切取0.5-1 毫米,加一滴醋酸洋红
染色,约10分钟后即可压片镜检。为了使染色效果更理想,最好能将
解离好的材料,置4%铁矾液中媒染4-12小时,流水冲洗10分钟,蒸馏
水浸洗2 次,然后滴染或者丢入醋酸洋红液中染色4-24小时。

    加盖玻片,左手按住盖玻片勿使晃动,用镊柄轻击盖片下的材料,
使之成一均匀雾状薄层。然后反复在酒精灯上加热至近沸腾为止。

    6.镜检放显微镜下观察,寻找分裂中期的细胞,进行计数、照相。

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