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用显微镜直接检查菌数-微生物实验光学仪器

信息分类:生命科学资讯  日期: 2014-4-23 19:09:45  作者:YIYI发布 

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显微镜直接检查菌数-微生物实验光学仪器


    由于用显微镜直接检查菌数不易辨明微生物孢子的死活,故需用人工培养的
方法予以稀释后,再根据倍数直接从长出的单菌落统计每克中所含的活袍子数。

    例如测定“5406" 菌剂时,先称取碾碎的”5406" 样品1 克,倒入盛有“毫
升水的三角玻瓶里( 瓶里装有玻璃珠或粗砂粒20-30 粒,事先连水进行高压灭菌
) ,另加”脱温“扩散剂1 滴( 或加5%的洗衣粉水溶液1 毫升) ,振摇20分钟,
使孢子匀散水里( 不要摇湿棉花塞) ,这就把菌剂稀释了100 倍。再取灭菌吸管
或注射器吸出菌液I 毫升,注入盛有9 毫升灭菌水的试管里,振摇匀散后,继续
如法往下扩大。由于吸管或注射器管壁上能沾附大量泡子,所以每次注入试管后,
要反复吸吐灭菌水几次,尽量洗下壁上的孢子,以减少误差。有条件的工厂,每
级稀释都用三角瓶,每次换用另一枝吸管,这样做会更准确些。扩大多少倍,可
以根据菌剂的外观而定。上等品扩大到6 、7 、8 个试管时,就稀释到1 亿、10
亿和100 亿倍了。

    各经振摇几分钟,就用原吸管分别从8, 7, 6 号试管中吸出1 毫升( 如果作
3 次承复,就各在同一管里吸出3 次) 。注入灭菌培养皿中,皿盖上用蜡笔编号
. 然后在每个皿里倒入45℃左右的培养基15毫升,并趁热轻轻摇匀,使培养基平
铺皿底,不沾到皿盖上。冷凝后,把皿翻转,平放在28℃温箱里,一般5 天左右
取出计数。培养基和温度合适,2~ 3天内就可以检查。

    计数的方法是: 取出培养皿,迎光察看,如果培养基内外长出黄色圆形小点,
以后逐渐变白( 或转红) ,针尖触它比较硬,不易挑下,这就是"5406 “的菌落。
如果第6 号试管饱子液所做的平皿出现1 个菌落,就可以推定每克茵剂含有1 亿
个活抱子,如果7-号皿出现I 个菌落,就是每克菌剂含有10亿个活泡子;8号皿如
出现1 个菌落,就是每克菌剂含有100 亿个活抱子。如果8 号皿里出现100 个菌
落,就可以推定每克菌剂中含有活抱子高达10000 亿个。一般每级用3 个培养皿,
采用9 个皿的活抱子数平均值刁‘比较准确。月前在国内大多采用这个方法,实
际的数字要比这样推算的小得多,因为每次用水稀释10倍,抱子量的扩大往往只
有3~5 倍。但是大家采用同一的方法,有个统一的标准,也就知道菌剂的相对质
量了。

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