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使用倒置式生物显微镜观察培养皿毛细管结构

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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使用倒置式生物显微镜观察培养皿毛细管结构

透明膜(Zona Pellucida)移除
仪器
    1.        解剖显微镜
    2.        细胞培养箱 (37℃,5% CO2)
材料
    1.        未着床的胚胎 (以 morula aggregation 为例:取 2.5 dpc 的胚胎)
    2.        聚合盘
    3.        塑胶培养皿
    4.        口吹式毛细管组
    5.        Acid Tyrode's solution (e.g., Sigma T1788)
    6.        M2 及 M16 培养液
 实验步骤
    1.    于塑胶培养皿中準备数滴 M2 及 Acid Tyrode’s 溶液液滴。
    2.    将胚胎置入 M2 液滴中。一次取 20~50 颗胚胎于 Acid  Tyrode’s 液滴中清洗,待透明膜溶解后迅速将
          胚胎置入 M2 液滴中清洗,重复此步骤将所有胚胎的透明膜清除。
    3.    将胚胎以 M16 液滴清洗,将清洗后的胚胎置入聚合盘洞中培养(两颗胚胎与胚胎干细胞团进行融合)
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