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电子显微镜检标本制备-应为50-100毫微米

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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电子显微镜检标本制备可使用玻璃切片

    电子显微镜检术的标本制备

    因为电子仅在高度真空中运行时,才形成连续的电子微束,至少在现代常规
的电镜中,尚不可能把活细胞用于电镜柱内。因此,只能用电镜检查巳死而脱水
的材料。由于电镜的巨大分辨力,在很大程度上弥补了保存生活状态组织的老大
难问题。使用电镜观察时,

    在光学显微镜检术中认为是合适的大多数固定剂,都可产生在电镜下观察时
过分大的蛋白质性沉淀。传统的固定剂中,能有效地适用于电子显微镜检术的,
只有福尔马林、四氧化镶和钮一重铭酸盐混合物,其中还增加有丙烯醛和谷胧径
乙醛。现已发现使用其中任何一种致死剂时,重要的是用加人缓冲液的方法,使
固定剂的pH值保持在7.2-7.8 之间。

    使用最广的固定剂是1%或2%的四氧化锇缓冲液,其作用不仅能保存组织,而
且可对许多组织成分染色。电镜的“染色”,并不包括与有色染料的结合,因为
使用电子光学系统,不能记录颜色。

    因为常规电镜电子微束的穿透力非常小,所以组织切片必须非常薄,与光学
显微镜的5-10微米相比,应为50-100毫微米。电子显微镜检术标本制备最棘手的
工作,和影响成功的最常见故障,在于要切成这样极薄的切片,而不使其皱缩、
破裂和发生其它变形。这个工作可在使用玻璃刀或钻石刀的超薄切片机上完成。
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