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利用折射率不同,细胞影像增加对比度-相衬显微镜

信息分类:生命科学资讯    作者:YIYI发布 

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利用折射率不同,细胞影像增加对比度-相衬显微镜

生物学及医学应用

1.生物学能将显像技术推进至细胞的层级对于X光显微成像术能否在生命科
学方面有效应用的一个关键性挑战。因为X光能量在284~543eV区间的能量范
围内,含碳区域与水的相对比可以达到最大值,所以选择这个能量区间X光
显微术的,已可以在含水的状态下观察次细胞的结构。然而,这
个能量的X光光子最多只能穿透厚度超过几μm(大约是一个单一细胞厚度)
,因此在某方面来说限制了该项技术的应用潜力。

同调X光显微术由于利用折射率不同而造成的边缘加强效应,细胞影像可以
藉由硬X光而非软X光取得。利用此方式,可以在更真实的环境下来研究厚样
品内微结构的三度空间分析。我们成功地采用此方法],不需要藉由任何染
色或是增强对比的样品制备程序,而直接观察到细胞和次细胞等级的细微结
构。例如我们发现对于5mm厚的样品,从试片表面到指定的深度的细胞结构
,在不需要牺牲空间解析度的情况下,仍然可以被清楚地被识别。我们最近
的后续实验更证明短波长的硬X光能用于获得25-60nm解析度的影像重建,这
已大大超出基于绕射成像的光学显微镜的解析度。

藉由我们的方法可以相当简单地获得植物细胞的影像。图六显示的是在宽频
白光条件下孤挺花叶子的X光显微影像的例子。本图的水平视野(Field
 of View, FOV)约为1.5毫米。要制备可以观察的动物细胞也并不困难。图
七所示为人工培养且被固定住的老鼠脑部的神经元细胞。不仅神经元躯体可
以轻易的被观察到,互相连结的神经细胞轴突也可以被观察到。

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